RACE——cDNA末端快速克隆技术2

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从分子水平上获得特定DNA片段,包括目的基因分离,全长cDNA片段钓取,染色体步移,点突变,甲基化检测,SNP检测,线粒体分析等。通过技术手段,获得可用于研究的目的基因序列,同时通过对基因序列基本形状的分析,获得更多的遗传信息,如CDS编码及翻译情况,UTR区对表达的调控及转录后修饰,启动子区重要的motif序列及TSS位点,甲基化位点,SNP情况,基因的同源性,物种的进化地位等信息。是后续基因功能研究的基础。

您需要提供以下材料:

实验样品:

提取Total RNA的材料:动植物组织,细胞或菌液(保证材料充足);

或者由您直接提供总RNA: 3’RACE:Total RNA>15μg; 5’RACE:Total RNA>25μg。

序列信息:

大于200bp的已知序列(请注明已知序列的5’端及3’端):如果已知序列比较短,建议先进行3’RACE再进行5’RACE,以提高实验的成功率;

实验数据和参考文献:这将会帮助我们更好地理解您的实验背景,有利于实验的顺利进行。

您将获得以下结果:

实验报告:引物信息 实验过程 PCR产物照片;

测序结果:测序彩色波形图、测序方向图、碱基序列图;

实验产物:引物、测序用质粒(限产生克隆测序的情况)。

注:

1. 请保证材料或者总RNA新鲜,如果基因的含量较低或者未知序列较长,样品量需相应增加;

2. 我们会根据已知序列进行特异性扩增,如果得不到目的序列或为非目的基因的序列,我们将停止实验并收取实验成本费用;如果得到序列与您提供的序列有个别碱基不符,我们在征求您的意见后决定是否进行RACE实验;

3. 我们将设计跨内含子引物PCR检验基因表达水平,如果经验证,样品中基因表达含量低时,我们将与您沟通后,决定下一步实验使用的方法;

4. 对于原核生物RNA 我们仅进行5' RACE。

结果展示:

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