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基本信息
载体类型 | 大肠杆菌蛋白双表达载体,有两个多克隆位点(双启动子) |
载体抗性 | Amp |
载体标签 | N-His, C-S |
筛选标记 | / |
启动子 | T7lac |
表达水平 | 高拷贝 |
载体大小 | 5420bp |
克隆方法 | 多克隆位点,限制性内切酶 |
5' 测序引物 | DUETF1: TGGTGTCCGGGATCTCGA |
3' 测序引物 | DUETR1: 5'-GATTATGCGGCCGTGTACAA-3' |
备注: | 如有侵权请产权持有人尽快联系法务15927229196 |
质粒图谱和多克隆位点信息
注意:
客户在我公司选择构建载体服务项目时,请自行提供母源载体。
如要使用本公司保存的母源载体时,本公司不能保证所有母源载体完全符合客户预期,也不承担由此产生的任何责任。
载体描述
pETDuet-1载体被设计用来在大肠杆菌中同时表达两个外源基因. 载体含有两个多克隆位点,每一个多克隆位点是通过T7启动子/Lac操纵子和一个核糖体结合位点组成。pETDuet-1携带有pBR322质粒来源的ColE1复制子, lacI基因和氨苄抗性基因。
本载体可以与pACYCDuet-1载体联合使用,在合适的宿主菌中,可以一起共表达至多4个目的基因。插入在pETDuet-1载体多克隆位点1的目的基因可以使用pET Upstream Primer (Cat. No. 69214-3)和DuetDOWN1 Primer (Cat. No. 71179-3)进行测序,插入在多克隆位点2的目的基因可以通过DuetUP2 Primer (Cat. No. 71180-3)和T7 Terminator Primer (Cat. No. 69337-3)进行目的基因测序。
pETDuet™-1 is designed for the coexpression of two target genes. The vector contains two multiple cloning sites (MCS), each of which is preceded by a T7 promoter/lac operator and a ribosome binding site (rbs). The vector also carries the pBR322-derived
ColE1 replicon, lacI gene and ampicillin resistance gene. This vector can be used in combination with pACYCDuet™-1 (Cat. No. 71147-3) in an appropriate host strain for the coexpression of up to 4 target genes. Genes inserted into MCS1 can be sequenced using the pET Upstream Primer (Cat. No. 69214-3) and DuetDOWN1 Primer (Cat. No. 71179-3). Genes inserted into MCS2 can be sequenced using the DuetUP2 Primer (Cat. No. 71180-3) and T7 Terminator Primer (Cat. No. 69337-3)
载体序列
ORIGIN
1 aattgtgagc ggataacaat tcccctctag aaataatttt gtttaacttt aagaaggaga
61 tataccatgg gcagcagcca tcaccatcat caccacagcc aggatccgaa ttcgagctcg
121 gcgcgcctgc aggtcgacaa gcttgcggcc gcataatgct taagtcgaac agaaagtaat
181 cgtattgtac acggccgcat aatcgaaatt aatacgactc actatagggg aattgtgagc
241 ggataacaat tccccatctt agtatattag ttaagtataa gaaggagata tacatatggc
301 agatctcaat tggatatcgg ccggccacgc gatcgctgac gtcggtaccc tcgagtctgg
361 taaagaaacc gctgctgcga aatttgaacg ccagcacatg gactcgtcta ctagcgcagc
421 ttaattaacc taggctgctg ccaccgctga gcaataacta gcataacccc ttggggcctc
481 taaacgggtc ttgaggggtt ttttgctgaa aggaggaact atatccggat tggcgaatgg
541 gacgcgccct gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg cagcgtgacc
601 gctacacttg ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc ctttctcgcc
661 acgttcgccg gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg gttccgattt
721 agtgctttac ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc acgtagtggg
781 ccatcgccct gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt ctttaatagt
841 ggactcttgt tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc ttttgattta
901 taagggattt tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta acaaaaattt
961 aacgcgaatt ttaacaaaat attaacgttt acaatttctg gcggcacgat ggcatgagat
1021 tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct
1081 aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta
1141 tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa
1201 ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac
1261 gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa
1321 gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag
1381 taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg
1441 tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag
1501 ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg
1561 tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc
1621 ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat
1681 tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata
1741 ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa
1801 aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca
1861 actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc
1921 aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc
1981 tttttcaatc atgattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt
2041 gaatgtattt agaaaaataa acaaataggt catgaccaaa atcccttaac gtgagttttc
2101 gttccactga gcgtcagacc ccgtagaaaa gatcaaagga tcttcttgag atcctttttt
2161 tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa aaaaccaccg ctaccagcgg tggtttgttt
2221 gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc gaaggtaact ggcttcagca gagcgcagat
2281 accaaatact gtccttctag tgtagccgta gttaggccac cacttcaaga actctgtagc
2341 accgcctaca tacctcgctc tgctaatcct gttaccagtg gctgctgcca gtggcgataa
2401 gtcgtgtctt accgggttgg actcaagacg atagttaccg gataaggcgc agcggtcggg
2461 ctgaacgggg ggttcgtgca cacagcccag cttggagcga acgacctaca ccgaactgag
2521 atacctacag cgtgagctat gagaaagcgc cacgcttccc gaagggagaa aggcggacag
2581 gtatccggta agcggcaggg tcggaacagg agagcgcacg agggagcttc cagggggaaa
2641 cgcctggtat ctttatagtc ctgtcgggtt tcgccacctc tgacttgagc gtcgattttt
2701 gtgatgctcg tcaggggggc ggagcctatg gaaaaacgcc agcaacgcgg cctttttacg
2761 gttcctggcc ttttgctggc cttttgctca catgttcttt cctgcgttat cccctgattc
2821 tgtggataac cgtattaccg cctttgagtg agctgatacc gctcgccgca gccgaacgac
2881 cgagcgcagc gagtcagtga gcgaggaagc ggaagagcgc ctgatgcggt attttctcct
2941 tacgcatctg tgcggtattt cacaccgcat atatggtgca ctctcagtac aatctgctct
3001 gatgccgcat agttaagcca gtatacactc cgctatcgct acgtgactgg gtcatggctg
3061 cgccccgaca cccgccaaca cccgctgacg cgccctgacg ggcttgtctg ctcccggcat
3121 ccgcttacag acaagctgtg accgtctccg ggagctgcat gtgtcagagg ttttcaccgt
3181 catcaccgaa acgcgcgagg cagctgcggt aaagctcatc agcgtggtcg tgaagcgatt
3241 cacagatgtc tgcctgttca tccgcgtcca gctcgttgag tttctccaga agcgttaatg
3301 tctggcttct gataaagcgg gccatgttaa gggcggtttt ttcctgtttg gtcactgatg
3361 cctccgtgta agggggattt ctgttcatgg gggtaatgat accgatgaaa cgagagagga
3421 tgctcacgat acgggttact gatgatgaac atgcccggtt actggaacgt tgtgagggta
3481 aacaactggc ggtatggatg cggcgggacc agagaaaaat cactcagggt caatgccagc
3541 gcttcgttaa tacagatgta ggtgttccac agggtagcca gcagcatcct gcgatgcaga
3601 tccggaacat aatggtgcag ggcgctgact tccgcgtttc cagactttac gaaacacgga
3661 aaccgaagac cattcatgtt gttgctcagg tcgcagacgt tttgcagcag cagtcgcttc
3721 acgttcgctc gcgtatcggt gattcattct gctaaccagt aaggcaaccc cgccagccta
3781 gccgggtcct caacgacagg agcacgatca tgctagtcat gccccgcgcc caccggaagg
3841 agctgactgg gttgaaggct ctcaagggca tcggtcgaga tcccggtgcc taatgagtga
3901 gctaacttac attaattgcg ttgcgctcac tgcccgcttt ccagtcggga aacctgtcgt
3961 gccagctgca ttaatgaatc ggccaacgcg cggggagagg cggtttgcgt attgggcgcc
4021 agggtggttt ttcttttcac cagtgagacg ggcaacagct gattgccctt caccgcctgg
4081 ccctgagaga gttgcagcaa gcggtccacg ctggtttgcc ccagcaggcg aaaatcctgt
4141 ttgatggtgg ttaacggcgg gatataacat gagctgtctt cggtatcgtc gtatcccact
4201 accgagatgt ccgcaccaac gcgcagcccg gactcggtaa tggcgcgcat tgcgcccagc
4261 gccatctgat cgttggcaac cagcatcgca gtgggaacga tgccctcatt cagcatttgc
4321 atggtttgtt gaaaaccgga catggcactc cagtcgcctt cccgttccgc tatcggctga
4381 atttgattgc gagtgagata tttatgccag ccagccagac gcagacgcgc cgagacagaa
4441 cttaatgggc ccgctaacag cgcgatttgc tggtgaccca atgcgaccag atgctccacg
4501 cccagtcgcg taccgtcttc atgggagaaa ataatactgt tgatgggtgt ctggtcagag
4561 acatcaagaa ataacgccgg aacattagtg caggcagctt ccacagcaat ggcatcctgg
4621 tcatccagcg gatagttaat gatcagccca ctgacgcgtt gcgcgagaag attgtgcacc
4681 gccgctttac aggcttcgac gccgcttcgt tctaccatcg acaccaccac gctggcaccc
4741 agttgatcgg cgcgagattt aatcgccgcg acaatttgcg acggcgcgtg cagggccaga
4801 ctggaggtgg caacgccaat cagcaacgac tgtttgcccg ccagttgttg tgccacgcgg
4861 ttgggaatgt aattcagctc cgccatcgcc gcttccactt tttcccgcgt tttcgcagaa
4921 acgtggctgg cctggttcac cacgcgggaa acggtctgat aagagacacc ggcatactct
4981 gcgacatcgt ataacgttac tggtttcaca ttcaccaccc tgaattgact ctcttccggg
5041 cgctatcatg ccataccgcg aaaggttttg cgccattcga tggtgtccgg gatctcgacg
5101 ctctccctta tgcgactcct gcattaggaa gcagcccagt agtaggttga ggccgttgag
5161 caccgccgcc gcaaggaatg gtgcatgcaa ggagatggcg cccaacagtc ccccggccac
5221 ggggcctgcc accataccca cgccgaaaca agcgctcatg agcccgaagt ggcgagcccg
5281 atcttcccca tcggtgatgt cggcgatata ggcgccagca accgcacctg tggcgccggt
5341 gatgccggcc acgatgcgtc cggcgtagag gatcgagatc gatctcgatc ccgcgaaatt
5401 aatacgactc actatagggg
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