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基本信息
载体类型: | 毕赤酵母蛋白分泌表达载体 |
载体抗性: | Zeocin(博来霉素) |
载体标签: | C-Myc, C-His |
筛选标记: | HIS4 |
启动子: | AOX1 |
高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
载体大小: | 3597 bp |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
5' 测序引物: | 5´ AOX1:5´- GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´ |
3' 测序引物: | 3´ AOX1:5´- GGCAAATGGCATTCTGACAT-3´ |
组成型/诱导型: | 甲醇诱导 |
备注: | 如有侵权请产权持有人尽快联系法务15927229196 |
质粒图谱和多克隆位点信息
注意:
客户在我公司选择构建载体服务项目时,请自行提供母源载体。
如要使用本公司保存的母源载体时,本公司不能保证所有母源载体完全符合客户预期,也不承担由此产生的任何责任。
载体描述
pPICZαA,B和C是3.6 kb的毕赤酵母蛋白分泌表达载体。表达的重组蛋白是融合蛋白,含有一个N-端多肽,编码酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)α-因子分泌信号。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白,并且可以用在任何毕赤酵母中,包括X33,GS115菌株,SMD1168H,KM71H。
pPICZα A,B和C系列载体包含以下内容:①5'端含有AOX1启动子的严格调控,利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因(Ellis等,1985; Koutz等人,1989;tschopp等人,1987A)。②α-因子分泌信号能够分泌性表达目的蛋白。③Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选(Baron等人,1992; Drocourt等人,1990)。④C-端含Myc和His标签,可以用于检测和纯化重组蛋白。⑤pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。
载体序列
ORIGIN
1 agatctaaca tccaaagacg aaaggttgaa tgaaaccttt ttgccatccg acatccacag
61 gtccattctc acacataagt gccaaacgca acaggagggg atacactagc agcagaccgt
121 tgcaaacgca ggacctccac tcctcttctc ctcaacaccc acttttgcca tcgaaaaacc
181 agcccagtta ttgggcttga ttggagctcg ctcattccaa ttccttctat taggctacta
241 acaccatgac tttattagcc tgtctatcct ggcccccctg gcgaggttca tgtttgttta
301 tttccgaatg caacaagctc cgcattacac ccgaacatca ctccagatga gggctttctg
361 agtgtggggt caaatagttt catgttcccc aaatggccca aaactgacag tttaaacgct
421 gtcttggaac ctaatatgac aaaagcgtga tctcatccaa gatgaactaa gtttggttcg
481 ttgaaatgct aacggccagt tggtcaaaaa gaaacttcca aaagtcggca taccgtttgt
541 cttgtttggt attgattgac gaatgctcaa aaataatctc attaatgctt agcgcagtct
601 ctctatcgct tctgaacccc ggtgcacctg tgccgaaacg caaatgggga aacacccgct
661 ttttggatga ttatgcattg tctccacatt gtatgcttcc aagattctgg tgggaatact
721 gctgatagcc taacgttcat gatcaaaatt taactgttct aacccctact tgacagcaat
781 atataaacag aaggaagctg ccctgtctta aacctttttt tttatcatca ttattagctt
841 actttcataa ttgcgactgg ttccaattga caagcttttg attttaacga cttttaacga
901 caacttgaga agatcaaaaa acaactaatt attcgaaacg atgagatttc cttcaatttt
961 tactgctgtt ttattcgcag catcctccgc attagctgct ccagtcaaca ctacaacaga
1021 agatgaaacg gcacaaattc cggctgaagc tgtcatcggt tactcagatt tagaagggga
1081 tttcgatgtt gctgttttgc cattttccaa cagcacaaat aacgggttat tgtttataaa
1141 tactactatt gccagcattg ctgctaaaga agaaggggta tctctcgaga aaagagaggc
1201 tgaagctgca ggaattcacg tggcccagcc ggccgtctcg gatcggtacc tcgagccgcg
1261 gcggccgcca gctttctaga acaaaaactc atctcagaag aggatctgaa tagcgccgtc
1321 gaccatcatc atcatcatca ttgagtttgt agccttagac atgactgttc ctcagttcaa
1381 gttgggcact tacgagaaga ccggtcttgc tagattctaa tcaagaggat gtcagaatgc
1441 catttgcctg agagatgcag gcttcatttt tgatactttt ttatttgtaa cctatatagt
1501 ataggatttt ttttgtcatt ttgtttcttc tcgtacgagc ttgctcctga tcagcctatc
1561 tcgcagctga tgaatatctt gtggtagggg tttgggaaaa tcattcgagt ttgatgtttt
1621 tcttggtatt tcccactcct cttcagagta cagaagatta agtgagacct tcgtttgtgc
1681 ggatccccca cacaccatag cttcaaaatg tttctactcc ttttttactc ttccagattt
1741 tctcggactc cgcgcatcgc cgtaccactt caaaacaccc aagcacagca tactaaattt
1801 tccctctttc ttcctctagg gtgtcgttaa ttacccgtac taaaggtttg gaaaagaaaa
1861 aagagaccgc ctcgtttctt tttcttcgtc gaaaaaggca ataaaaattt ttatcacgtt
1921 tctttttctt gaaatttttt tttttagttt ttttctcttt cagtgacctc cattgatatt
1981 taagttaata aacggtcttc aatttctcaa gtttcagttt catttttctt gttctattac
2041 aacttttttt acttcttgtt cattagaaag aaagcatagc aatctaatct aaggggcggt
2101 gttgacaatt aatcatcggc atagtatatc ggcatagtat aatacgacaa ggtgaggaac
2161 taaaccatgg ccaagttgac cagtgccgtt ccggtgctca ccgcgcgcga cgtcgccgga
2221 gcggtcgagt tctggaccga ccggctcggg ttctcccggg acttcgtgga ggacgacttc
2281 gccggtgtgg tccgggacga cgtgaccctg ttcatcagcg cggtccagga ccaggtggtg
2341 ccggacaaca ccctggcctg ggtgtgggtg cgcggcctgg acgagctgta cgccgagtgg
2401 tcggaggtcg tgtccacgaa cttccgggac gcctccgggc cggccatgac cgagatcggc
2461 gagcagccgt gggggcggga gttcgccctg cgcgacccgg ccggcaactg cgtgcacttc
2521 gtggccgagg agcaggactg acacgtccga cggcggccca cgggtcccag gcctcggaga
2581 tccgtccccc ttttcctttg tcgatatcat gtaattagtt atgtcacgct tacattcacg
2641 ccctcccccc acatccgctc taaccgaaaa ggaaggagtt agacaacctg aagtctaggt
2701 ccctatttat ttttttatag ttatgttagt attaagaacg ttatttatat ttcaaatttt
2761 tctttttttt ctgtacagac gcgtgtacgc atgtaacatt atactgaaaa ccttgcttga
2821 gaaggttttg ggacgctcga aggctttaat ttgcaagctg gagaccaaca tgtgagcaaa
2881 aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt tccataggct
2941 ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc gaaacccgac
3001 aggactataa agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct ctcctgttcc
3061 gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg tggcgctttc
3121 tcaatgctca cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca agctgggctg
3181 tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact atcgtcttga
3241 gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta acaggattag
3301 cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta actacggcta
3361 cactagaagg acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct tcggaaaaag
3421 agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt tttttgtttg
3481 caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga tcttttctac
3541 ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc acgttaaggg attttggtca tgagatc
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