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基本信息
载体类型: | 哺乳动物细胞miRNA表达报告载体,荧光报告载体 |
载体抗性: | Amp |
载体标签: | N-Luciferase(荧光素酶) |
筛选标记: | Puro |
启动子: | CMV |
高拷贝/低拷贝: | 高 |
载体大小: | 6470bp |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
5' 测序引物: | Luc-F: AGTCAAGTAACAACCGCGA |
3' 测序引物: | pMIR-R: CGACGCAAGAAAAATCAGAG |
备注: | 如有侵权请产权持有人尽快联系法务15927229196 |
质粒图谱和多克隆位点信息
注意:
客户在我公司选择构建载体服务项目时,请自行提供母源载体。
如要使用本公司保存的母源载体时,本公司不能保证所有母源载体完全符合客户预期,也不承担由此产生的任何责任。
载体描述
pMIR-REPORT miRNA表达报告基因载体系统由一个实验萤火虫荧光素酶报告载体和相关的β-半乳糖苷酶报告对照质粒组成。通过在多克隆位点插入预测的miRNA靶序列,pMIR-REPORT荧光素酶报告miRNA表达报告载体可以被用来进行准确的,定量的,评估细胞内miRNA的功能。它也可以被用来检测siRNA的靶位点和分析3'端非编码区序列对基因表达的影响。pMIR-REPORT Luciferase载体包含一个CMV启动子和终止子控制下的萤火虫荧光素酶报告基因。在荧光素酶基因的3'端非编码区包含一个多克隆位点,用于插入的预测miRNA的结合靶序列或其他核苷酸序列。通过将预测的miRNA靶序列克隆插入到pMIR-REPORT载体,荧光素酶报告表达就收到调节。这模仿的miRNA靶序列的作用方式。
pMIR-REPORT β-gal质粒是一个β-半乳糖苷酶报告质粒,其被设计用于细胞转染操作流程的标准化探索。 该对照质粒表达的β-半乳糖苷酶,可以用来标准化由于细胞活力和转染效率差异导致的细胞表达水平的多样性。
作为附加的功能,pMIR-REPORT Luciferase和pMIR-REPORT β-gal分别含有嘌呤霉素和新霉素抗性基因,这可以用于选择转染成功的哺乳动物细胞。研究需要的话,抗生素选择可用于构建pMIR-REPORT载体质粒稳表达细胞系。对于大多数应用,瞬表达是足够的,抗生素的筛选也是没有必要的。
载体序列TCGCGCGTTTCGGTGATGACGGTGAAAACCTCTGACACATGCAGCTCCCGGAGACGGTCACAGCTTGTCTGTAAGCGGATGCCGGGAGCAGACAAGCCCGTCAGGGCGCGTCAGCGGGTGTTGGCGGGTGTCGGGGCTGGCTTAACTATGCGGCATCAGAGCAGATTGTACTGAGAGTGCACCATATGCGGTGTGAAATACCGCACAGATGCGTAAGGAGAAAATACCGCATCAGGCGCCATTCGCCATTCAGGCTGCGCAACTGTTGGGAAGGGCGATCGGTGCGGGCCTCTTCGCTATTACGCCAGCTGGCGAAAGGGGGATGTGCTGCAAGGCGATTAAGTTGGGTAACGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGACGTTGTAAAACGACGGCCAGTGCCAAGCTAGCGGCCGCATACAAAAAACCAACACACAGATCCAATGAAAATAAAAGATCCTTTATTAAGCTTAACTGTTTAAACCTATGATATCACGCACGCGTCTATGCCGGCCTATGAGCTCCCTCACTAGTGCGCAGCTTTCATCACTCGAGCAATTTGGACTTTCCGCCCTTCTTGGCCTTTATGAGGATCTCTCTGATTTTTCTTGCGTCGAGTTTTCCGGTAAGACCTTTCGGTACTTCGTCCACAAACACAACTCCTCCGCGCAACTTTTTCGCGGTTGTTACTTGACTGGCGACGTAATCCACGATCTCTTTTTCCGTCATCGTCTTTCCGTGCTCCAAAACAACAACGGCGGCGGGAAGTTCACCGGCGTCATCGTCGGGAAGACCTGCCACGCCCGCGTCGAAGATGTTGGGGTGTTGTAACAATATCGATTCCAATTCAGCGGGGGCCACCTGATATCCTTTGTATTTAATTAAAGACTTCAAGCGGTCAACTATGAAGAAGTGTTCGTCTTCGTCCCAGTAAGCTATGTCTCCAGAATGTAGCCATCCATCCTTGTCAATCAAGGCGTTGGTCGCTTCCGGATTGTTTACATAACCGGACATAATCATAGGTCCTCTGACACATAATTCGCCTCTCTGATTAACGCCCAGCGTTTTCCCGGTATCCAGATCCACAACCTTCGCTTCAAAAAATGGAACAACTTTACCGACCGCGCCCGGTTTATCATCCCCCTCGGGTGTAATCAGAATAGCTGATGTAGTCTCAGTGAGCCCATATCCTTGTCGTATCCCTGGAAGATGGAAGCGTTTTGCAACCGCTTCCCCGACTTCTTTCGAAAGAGGTGCGCCCCCAGAAGCAATTTCGTGTAAATTAGATAAATCGTATTTGTCAATCAGAGTGCTTTTGGCGAAGAATGAAAATAGGGTTGGTACTAGCAACGCACTTTGAATTTTGTAATCCTGAAGGGATCGTAAAAACAGCTCTTCTTCAAATCTATACATTAAGACGACTCGAAATCCACATATCAAATATCCGAGTGTAGTAAACATTCCAAAACCGTGATGGAATGGGACAACACTTAAAATCGCAGTATCCGGAACGATTTGATTGCCAAAAATAGGATCTCTGGCATGCGAGAATCTGACGCAGGCAGTTCTATGCGGAAGGGCCACACCCTTAGGTAACCCAGTAGATCCAGAGGAATTCATTATCAGTGCAATTGTTTTGTCACGATCAAAGGACTCTGGTACAAAATCGTATTCATTAAAACCGGGAGGTAGATGAGATGTGACGAACGTGTACATCGACTGAAATCCCTGGTAATCCGTTTTAGAATCCATGATAATAATTTTCTGGATTATTGGTAATTTTTTTTGCACGTTCAAAATTTTTTGCAACCCCTTTTTGGAAACAAACACTACGGTAGGCTGCGAAATGTTCATACTGTTGAGCAATTCACGTTCATTATAAATGTCGTTCGCGGGCGCAACTGCAACTCCGATAAATAACGCGCCCAACACCGGCATAAAGAATTGAAGAGAGTTTTCACTGCATACGACGATTCTGTGATTTGTATTCAGCCCATATCGTTTCATAGCTTCTGCCAACCGAACGGACATTTCGAAGTATTCCGCGTACGTGATGTTCACCTCGATATGTGCATCTGTAAAAGCAATTGTTCCAGGAACCAGGGCGTATCTCTTCATAGCCTTATGCAGTTGCTCTCCAGCGGTTCCATCCTCTAGAGGATAGAATGGCGCCGGGCCTTTCTTTATGTTTTTGGCGTCTTCCATGGTGGATCCACGGTTCACTAAACCAGCTCTGCTTATATAGACCTCCCACCGTACACGCCTACCGCCCATTTGCGTCAATGGGGCGGAGTTGTTACGACATTTTGGAAAGTCCCGTTGATTTTGGTGCCAAAACAAACTCCCATTGACGTCAATGGGGTGGAGACTTGGAAATCCCCGTGAGTCAAACCGCTATCCACGCCCATTGATGTACTGCCAAAACCGCATCACCATGGTAATAGCGATGACTAATACGTAGATGTACTGCCAAGTAGGAAAGTCCCATAAGGTCATGTACTGGGCATAATGCCAGGCGGGCCATTTACCGTCATTGACGTCAATAGGGGGCGTACTTGGCATATGATACACTTGATGTACTGCCAAGTGGGCAGTTTACCGTAAATACTCCACCCATTGACGTCAATGGAAAGTCCCTATTGGCGTTACTATGGGAACATACGTCATTATTGACGTCAATGGGCGGGGGTCGTTGGGCGGTCAGCCAGGCGGGCCATTTACCGTAAGTTATGTAACGCGGAACTCCATATATGGGCTATGAACTAATGACCCCGTAATTGATTACTATTAATAACTAAGATCTGGTACCTTGAATTCATGCTTCTCCTCCCTTTAGTGAGGGTAATTCTCTCTCTCTCCCTATAGTGAGTCGTATTAATTCCTTCTCTTCTATAGTGTCACCTAAATCGTTGCAATTCGTAATCATGTCATAGCTGTTTCCTGTGTGAAATTGTTATCCGCTCACAATTCCACACAACATACGAGCCGGAAGCATAAAGTGTAAAGCCTGGGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTCACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCTCTTCCGCTTCCTCGCTCACTGACTCGCTGCGCTCGGTCGTTCGGCTGCGGCGAGCGGTATCAGCTCACTCAAAGGCGGTAATACGGTTATCCACAGAATCAGGGGATAACGCAGGAAAGAACATGTGAGCAAAAGGCCAGCAAAAGGCCAGGAACCGTAAAAAGGCCGCGTTGCTGGCGTTTTTCCATAGGCTCCGCCCCCCTGACGAGCATCACAAAAATCGACGCTCAAGTCAGAGGTGGCGAAACCCGACAGGACTATAAAGATACCAGGCGTTTCCCCCTGGAAGCTCCCTCGTGCGCTCTCCTGTTCCGACCCTGCCGCTTACCGGATACCTGTCCGCCTTTCTCCCTTCGGGAAGCGTGGCGCTTTCTCATAGCTCACGCTGTAGGTATCTCAGTTCGGTGTAGGTCGTTCGCTCCAAGCTGGGCTGTGTGCACGAACCCCCCGTTCAGCCCGACCGCTGCGCCTTATCCGGTAACTATCGTCTTGAGTCCAACCCGGTAAGACACGACTTATCGCCACTGGCAGCAGCCACTGGTAACAGGATTAGCAGAGCGAGGTATGTAGGCGGTGCTACAGAGTTCTTGAAGTGGTGGCCTAACTACGGCTACACTAGAAGAACAGTATTTGGTATCTGCGCTCTGCTGAAGCCAGTTACCTTCGGAAAAAGAGTTGGTAGCTCTTGATCCGGCAAAAAAACCACCGCTGGTAGCGGTGGTTTTTTTGTTTGCAAGCAGCAGATTACGCGCAGAAAAAAAGGATCTCAAGAAGATCCTTTGATCTTTTCTACGGGGTCTGACGCTCAGTGGAACGAAAACTCACGTTAAGGGATTTTGGTCATGAGATTATCAAAAAGGATCTTCACCTAGATCCTTTTAAATTAAAAATGAAGTTTTAAATCAATCTAAAGTATATATGAGTAAACTTGGTCTGACAGTTACCAATGCTTAATCAGTGAGGCACCTATCTCAGCGATCTGTCTATTTCGTTCATCCATAGTTGCCTGACTCCCCGTCGTGTAGATAACTACGATACGGGAGGGCTTACCATCTGGCCCCAGTGCTGCAATGATACCGCGAGACCCACGCTCACCGGCTCCAGATTTATCAGCAATAAACCAGCCAGCCGGAAGGGCCGAGCGCAGAAGTGGTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCATCCAGTCTATTAATTGTTGCCGGGAAGCTAGAGTAAGTAGTTCGCCAGTTAATAGTTTGCGCAACGTTGTTGCCATTGCTACAGGCATCGTGGTGTCACGCTCGTCGTTTGGTATGGCTTCATTCAGCTCCGGTTCCCAACGATCAAGGCGAGTTACATGATCCCCCATGTTGTGCAAAAAAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCCGATCGTTGTCAGAAGTAAGTTGGCCGCAGTGTTATCACTCATGGTTATGGCAGCACTGCATAATTCTCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAATAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAACTTTAAAAGTGCTCATCATTGGAAAACGTTCTTCGGGGCGAAAACTCTCAAGGATCTTACCGCTGTTGAGATCCAGTTCGATGTAACCCACTCGTGCACCCAACTGATCTTCAGCATCTTTTACTTTCACCAGCGTTTCTGGGTGAGCAAAAACAGGAAGGCAAAATGCCGCAAAAAAGGGAATAAGGGCGACACGGAAATGTTGAATACTCATACTCTTCCTTTTTCAATATTATTGAAGCATTTATCAGGGTTATTGTCTCATGA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