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基本信息

质粒图谱和多克隆位点信息

注意：

客户在我公司选择构建载体服务项目时，请自行提供母源载体。

如要使用本公司保存的母源载体时，本公司不能保证所有母源载体完全符合客户预期，也不承担由此产生的任何责任。

载体描述

阐明蛋白质的结构和功能是后基因组研究的一个重要课题。高效率的蛋白质表达系统是研究这些课题的不可缺少的基本技术。大肠杆菌作为宿主的表达系统中被广泛使用于生产重组蛋白。大肠杆菌表达系统具有良好的优势,方法简单，成本低。然而，对于某些基因，蛋白表达很困难，表达的蛋白质不溶。

为了解决这些问题，TAKARA与Masayori Inouye教授（美国新泽西医学和牙科大学）进行联合研究，以制定一个高效基于低温冷休克蛋白基因的大肠杆菌表达载体。pCold DNA系列产品具有上述的优点，并提供了一个重要功能和结构的分析以及其他蛋白质研究领域的工具。

<产品概况和特点>

当培养的大肠杆菌的温度充分降低，几乎暂时停止生长大部分的蛋白表达减少，而此时一组蛋白质称为“冷休克蛋白”被专门诱导表达。

冷休克表达载体，pCold I-IV, 是利用冷休克基因cspA启动子设计高效率蛋白质表达载体。cspA的启动子的下游处，插入了lac操纵子，以便严格控制表达。此外，5'非翻译区（5'UTR），翻译增强元件（TEE），His标签序列，Xa因子切割位点和多克隆位点（MCS）位于在cspA启动子的下游的。由于该产品采用了大肠杆菌的启动子，大多数大肠杆菌菌株可被用作表达宿主。有四种类型的pCold载体，他们的原件的位置稍有不同，TEE，His标签序列和Factor Xa酶切位点。

载体序列

ORIGIN

        1 aaggaatggt gtggccgatt aatcataaat atgaaaaata attgttgcat cacccgccaa

       61 tgcgtggctt aatgcacatc aaattgtgag cggataacaa tttgatgtgc tagcgcatat

      121 ccagtgtagt aaggcaagtc ccttcaagag ttatcgttga tacccctcgt agtgcacatt

      181 cctttaacgc ttcaaaatct gtaaagcacg ccatatcgcc gaaaggcaca cttaattatt

      241 aagaggtaat acaccatgaa tcacaaagtg catcatcatc atcatcatat cgaaggtagg

      301 catatggagc tcggtaccct cgagggatcc gaattcaagc ttgtcgacct gcagtctaga

      361 taggtaatct ctgcttaaaa gcacagaatc taagatccct gccatttggc ggggattttt

      421 ttatttgttt tcaggaaata aataatcgat cgcgtaataa aatctattat tatttttgtg

      481 aagaataaat ttgggtgcaa tgagaatgcg caggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga

      541 tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc

      601 ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg

      661 ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata aaattgtaaa

      721 cgttaatatt ttgttaaaat tcgcgttaaa tttttgttaa atcagctcat tttttaacca

      781 ataggccgaa atcggcaaaa tcccttataa atcaaaagaa tagcccgaga tagggttgag

      841 tgttgttcca gtttggaaca agagtccact attaaagaac gtggactcca acgtcaaagg

      901 gcgaaaaacc gtctatcagg gcgatggccc actacgtgaa ccatcaccca aatcaagttt

      961 tttggggtcg aggtgccgta aagcactaaa tcggaaccct aaagggagcc cccgatttag

     1021 agcttgacgg ggaaagccgg cgaacgtggc gagaaaggaa gggaagaaag cgaaaggagc

     1081 gggcgctagg gcgctggcaa gtgtagcggt cacgctgcgc gtaaccacca cacccgccgc

     1141 gcttaatgcg ccgctacagg gcgcgtacta tggttgcttt gacgtatgcg gtgtgaaata

     1201 ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgtc aggtggcact tttcggggaa

     1261 atgtgcgcgg aacccctatt tgtttatttt tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca

     1321 tgagacaata accctgataa atgcttcaat aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc

     1381 aacatttccg tgtcgccctt attccctttt ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc

     1441 acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt

     1501 acatcgaact ggatctcaac agcggtaaga tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt

     1561 ttccaatgat gagcactttt aaagttctgc tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg

     1621 ccgggcaaga gcaactcggt cgccgcatac actattctca gaatgacttg gttgagtact

     1681 caccagtcac agaaaagcat cttacggatg gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg

     1741 ccataaccat gagtgataac actgcggcca acttacttct gacaacgatc ggaggaccga

     1801 aggagctaac cgcttttttg cacaacatgg gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg

     1861 aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa

     1921 tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg gcgaactact tactctagct tcccggcaac

     1981 aattaataga ctggatggag gcggataaag ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc

     2041 cggctggctg gtttattgct gataaatctg gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca

     2101 ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct cccgtatcgt agttatctac acgacgggga

     2161 gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac agatcgctga gataggtgcc tcactgatta

     2221 agcattggta actgtcagac caagtttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc

     2281 atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc

     2341 cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt

     2401 cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac

     2461 cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc taccaactct ttttccgaag gtaactggct

     2521 tcagcagagc gcagatacca aatactgttc ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact

     2581 tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg

     2641 ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg ggttggactc aagacgatag ttaccggata

     2701 aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga

     2761 cctacaccga actgagatac ctacagcgtg agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag

     2821 ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg

     2881 agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac

     2941 ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag gggggcggag cctatggaaa aacgccagca

     3001 acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt gctggccttt tgctcacata gtcatgcccc

     3061 gcgcccaccg gaaggagctg actgggttga aggctctcaa gggcatcggt cgagatcccg

     3121 gtgcctaatg agtgagctaa cttacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt

     3181 cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt

     3241 tgcgtattgg gcgccagggt ggtttttctt ttcaccagtg agacgggcaa cagctgattg

     3301 cccttcaccg cctggccctg agagagttgc agcaagcggt ccacgctggt ttgccccagc

     3361 aggcgaaaat cctgtttgat ggtggttaac ggcgggatat aacatgagct gtcttcggta

     3421 tcgtcgtatc ccactaccga gatatccgca ccaacgcgca gcccggactc ggtaatggcg

     3481 cgcattgcgc ccagcgccat ctgatcgttg gcaaccagca tcgcagtggg aacgatgccc

     3541 tcattcagca tttgcatggt ttgttgaaaa ccggacatgg cactccagtc gccttcccgt

     3601 tccgctatcg gctgaatttg attgcgagtg agatatttat gccagccagc cagacgcaga

     3661 cgcgccgaga cagaacttaa tgggcccgct aacagcgcga tttgctggtg acccaatgcg

     3721 accagatgct ccacgcccag tcgcgtaccg tcttcatggg agaaaataat actgttgatg

     3781 ggtgtctggt cagagacatc aagaaataac gccggaacat tagtgcaggc agcttccaca

     3841 gcaatggcat cctggtcatc cagcggatag ttaatgatca gcccactgac gcgttgcgcg

     3901 agaagattgt gcaccgccgc tttacaggct tcgacgccgc ttcgttctac catcgacacc

     3961 accacgctgg cacccagttg atcggcgcga gatttaatcg ccgcgacaat ttgcgacggc

     4021 gcgtgcaggg ccagactgga ggtggcaacg ccaatcagca acgactgttt gcccgccagt

     4081 tgttgtgcca cgcggttggg aatgtaattc agctccgcca tcgccgcttc cactttttcc

     4141 cgcgttttcg cagaaacgtg gctggcctgg ttcaccacgc gggaaacggt ctgataagag

     4201 acaccggcat actctgcgac atcgtataac gttactggtt tcacattcac caccctgaat

     4261 tgactctctt ccgggcgcta tcatgccata ccgcgaaagg ttttgcgcca ttcgatggtg

     4321 tccgggatct cgacgctctc ccttatgcga ctcctgcatt aggaagcagc ccagtagtag

     4381 gttgaggccg ttgagcaccg ccgccgc

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