技术简介

农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位(受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞)，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。

根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代，这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。

将目的基因片段构建到植物表达载体上（改造过的Ti质粒），转入农杆菌后T-DNA会与一系列Vir蛋白结合，在农杆菌侵染宿主时，目的基因的T-DNA片段会在该系列蛋白作用下转入宿主细胞并整合到宿主基因组内，从而实现转基因。

以烟草叶片作为转基因受体材料，用携带目标基因载体的农杆菌侵染受体材料，将T-DNA插入到基因组中，经过对应抗性的抗生素进行筛选，获得独立的抗性愈伤组织，进一步分化再生获得转基因株系。

服务内容

注：烟草品种：本生烟草。

技术优势

1. 专业的技术团队使您的实验高效、准确；

2. 丰富的载体构建经验，植物培养，转基因经验，满足客户不同的实验需求

服务流程(图)

载体构建——农杆菌转化——叶片侵染——分生组织筛选——转基因阳性苗的PCR鉴定

您需要提供以下材料：

1. 目的基因的模板与载体构建方案

2. 尽可能详细的实验信息与其他要求

服务周期

1. 目的序列克隆  10个工作日

2． 等待野生型烟草叶片/ 载体构建及农杆菌转化周期 15工作日

3. 烟草遗传转化，T1阳性苗，3-4个月

4. T1阳性苗移栽，1个月

5. T1代阳性苗收种，3个月

您将获得以下结果：

1. 遗传转化与筛选的部分图片；

2. 转基因苗分化及外源基因PCR检测的琼脂糖凝胶电泳图；

3. 转基因苗植株(3个阳性株系)。

烟草转化结果示例：