1 将目的基因片段构建至植物载体中; 2 将构建好的质粒转化农杆菌GV3101或EHA105; 3 农杆菌介导遗传转化、筛选(愈伤组织浸染);T1代阳性苗的PCR鉴定,分化成苗。
技术简介
以水稻成熟胚为起始材料,快速、高质量的诱导出水稻胚性愈伤组织作为转基因受体材料,用携带目标基因载体的农杆菌侵染受体材料,将T-DNA插入到基因组中,经过对应抗性的抗生素进行筛选,获得独立的抗性愈伤组织,进一步分化再生获得转基因株系。
应用领域
农杆菌介导的转基因研究,成为研究基因功能的重要手段,该技术可以使重组生物增加人们所期望的新性状,培育出新品种;是开展植物基因工程研究的经典方法。
服务内容
项目分类 | 服务内容 |
植物载体构建 | 将目的基因片段构建至植物载体中 |
农杆菌转化 | 将构建好的质粒转化农杆菌GV3101或EHA105 |
转基因水稻筛选鉴定 | 农杆菌介导遗传转化、筛选(愈伤组织浸染);T1代阳性苗的PCR鉴定,分化成苗。 |
注:1 根据不同的载体系统及待转基因的特性,有时转基因植株生长周期会发生变化;如果待转基因为败育、致死或发育、开花相关基因,我们不能保证实验结果及周期。
2 因待转基因特性具有不确定性,且实验周期较长,自2015年8月1日起的新订单,如果遇到个别实验失败,无法筛得阳性株,仍需酌情收取30%实验基础费用,敬请理解。
技术优势
1. 专业技术平台。从事多年转基因植物的技术团队,多种转化技术手段保证实验成功率。
2. 高效的实验机制。全年不间断种植转基因受体,随时开展转基因实验项目。
3. 提供实验全程进展,提供遗传转化、筛选的部分图片和T1转基因苗,外源基因PCR检测等琼脂糖凝胶电泳图。
服务流程(图)
载体构建——农杆菌转化——成熟胚诱导愈伤,制备外植体——农杆菌浸染胚性愈伤——诱导出芽——选择培养——T1代植株再生——T1代阳性苗的PCR鉴定
服务周期
1. 目的序列克隆,10工作日;
2. 载体构建(表达、沉默、敲除(CRISPR/Cas9)等各类载体),15工作日;
3. T1代阳性苗,4个月
您需要提供以下材料:
1. 目的基因的模板与载体构建方案
2. 尽可能详细的实验信息与其他要求
您将获得以下结果:
1. 遗传转化与筛选的部分图片;
2. T1代转基因苗外源基因PCR检测的琼脂糖凝胶电泳图;
3. T1代转基因苗。