技术简介

    农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位(受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞)，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代，这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。

    棉花为典型的木本植物，次生代谢产物丰富，因此其组织培养及遗传转化相对困难。目前，国际上用于棉花遗传转化的受体材料主要是陆地棉珂字棉品系及国内少数几个农艺性状差、生产上已淘汰的品种。

    国际上通用的棉花转化体系周期长达10-12个月，过长的组织培养时间易导致再生植株体细胞无性系变异严重。因此采用国际通用转化体系，高达30-40%的T0代植株出现不育，难以进行后续的遗传分析。本公司采用自主鉴定出的多个再生能力强、体细胞无性系变异小的棉花作为受体材料，建立了高效的农杆菌介导的遗传转化体系。平均转化周期比国际通用转化体系缩短2-3个月，只需8-10个月可获得大量的转基因T0代幼苗，且再生植株的不育率低于20%。

客户可提供目的基因、质粒、农杆菌等，我们为您完成从构建载体到获得转基因苗的整个实验过程。

应用领域

    农杆菌介导的转基因研究，成为研究基因功能的重要手段，该技术可以使重组生物增加人们所期望的新性状，培育出新品种；是开展植物基因工程研究的经典方法。

服务内容

注：1. 棉花品种：公司自主选育的品种。

2. 根据不同的载体系统及待转基因的特性，有时转基因植株生长周期会发生变化；如果待转基因为败育、致死或发育、开花相关基因，我们不能保证实验结果及周期。

3. 因待转基因特性具有不确定性，且实验周期较长，自2015年8月1日起的新订单，如果遇到个别实验失败，无法筛得阳性株，仍需酌情收取30%实验基础费用，敬请理解。

技术优势

    1. 专业技术平台。从事多年转基因植物的技术团队，多种转化技术手段保证实验成功率。

    2.  高效的实验机制。全年不间断种植转基因受体，随时开展转基因实验项目。

    3.  提供实验全程进展，提供遗传转化、筛选的部分图片和T0代转基因苗，外源基因PCR检测等琼脂糖凝胶电泳图。

服务流程(图)

    棉花无菌苗培育-制备外植体——载体构建——农杆菌转化——农杆菌浸染外植体、诱导坯性愈伤组织——诱导出芽、生根——移栽——T0代转基因苗外源基因PCR检测——成果提交

服务周期

    实验时间：全年均可开展实验；从实验开展到T0代转基因苗的检测结果，共需要8-10个月。

您需要提供以下材料：

    1. 客户提供需转化的载体，建议的选择标记为kanr或bar，也可选择本公司代为构建（费用另计）

    2. 标准服务的转基因受体品种为公司提供自有品种，受体材料为棉花下胚轴或棉花胚性愈伤；如果客户要求自己提供受体品种，需要进行预备实验以确认该品种能否转化

    3. 尽可能详细的实验信息与其他要求

您将获得以下结果：

    1. 遗传转化与筛选的部分图片；下胚轴诱导愈伤、或胚性愈伤诱导不定芽的分化与再生部分样品的图片；

    2. T0代转基因苗外源基因PCR检测的琼脂糖凝胶电泳图；

    3. T0代转基因苗。（15-20个阳性株系）

实验结果图片示例

棉花遗传转化流程