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甲基化检测

服务内容:

DNA样本经过亚硫酸氢盐处理后,用PCR扩增目的片段,并对PCR产物进行测序,将序列与未经处理的序列进行比较,判断CpG位点是否发生甲基化。操作方法可靠,且精确度高,能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态。

技术简介

      DNA甲基化是最早发现的基因表观修饰方式之一,真核生物中的甲基化仅发生于胞嘧啶(C),即在DNA甲基化转移酶(DNMTs)的作用下使CpG二核苷酸5’端的胞嘧啶转变为甲基胞嘧啶。DNA甲基化通常抑制基因表达,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。这种DNA修饰方式在不改变基因序列前提下实现对基因表达的调控, 这种DNA修饰的方式在脊椎动物的胚胎发育过程中起着重要的调控作用,参与多种疾病包括各种肿瘤的发病机理,是目前表观遗传学研究的热点。

      以重亚硫酸盐处理基因组DNA,发生甲基化的胞嘧啶不变,而未甲基化的胞嘧啶会变成尿嘧啶,经过PCR扩增,原本的C/G就变成T/A,可以通过测序区分。

      DNA甲基化检测实验流程长,操作烦琐,不易控制;亚硫酸氢钠处理DNA定量、PCR引物设计、PCR扩增条件的选择都需要非常丰富的实验经验。


适用领域

DNA甲基化是最常见的复制后及转录后修饰方式之一,在基因表达调控、发育调节、基因组

印迹等方面发挥重要作用,当前热门的应用有:

1.  基因甲基化与单亲遗传病

2.  基因甲基化与单亲遗传病

3.  基因甲基化与老化


服务内容


服务流程


样品与实验结果


实验结果示例



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